{"id":598,"date":"2017-10-04T11:39:44","date_gmt":"2017-10-04T15:09:44","guid":{"rendered":"http:\/\/www.basquade.com\/wpin\/?page_id=598"},"modified":"2017-10-04T11:52:20","modified_gmt":"2017-10-04T15:22:20","slug":"ensayo-en-conicet","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/www.basquade.com\/wpin\/ensayo-en-conicet\/","title":{"rendered":"Ensayo en CONICET"},"content":{"rendered":"<h2>Protocolo de Investigaci\u00f3n Cient\u00edfica.<\/h2>\n<p>PROTOCOLO DE TRABAJO<\/p>\n<p>Ensayos cin\u00e9ticos de proliferaci\u00f3n celular<\/p>\n<p>Estos ensayos se realizar\u00e1n sobre dos tipos celulares:<\/p>\n<p>C\u00e9lulas tumorales: l\u00ednea tumoral linfoide de origen murino BW 5147 que expresa el haplotipo H-2k, CD3+ y el TCRa\u00df, los cuales son testeados rutinariamente por citometr\u00eda de flujo usando anticuerpos espec\u00edficos contra los correspondientes marcadores de superficie.<\/p>\n<p>Linfocitos T normales provenientes de ganglios linf\u00e1ticos de ratones de la cepa BALG\/c de 3-4 meses de edad, obtenidos en forma as\u00e9ptica.<\/p>\n<p>Los ensayos in vitro se realizar\u00e1n en condiciones de esterilidad en microplacas de cultivo de 96 wells en un volumen final de 0.2 ml.<\/p>\n<p>El efecto sobre la proliferaci\u00f3n celular de la mezcla a ensayar ser\u00e1 evaluada a diferentes tiempos de cultivo (24, 48, 72 y 96 hs.) y en ausencia (Control) o presencia de diferentes concentraciones de mezcla a fin de determinar la cin\u00e9tica de acci\u00f3n del producto. Las concentraciones a ensayar ser\u00e1n diluciones seriadas al medio en un rango de concentraciones que incluye la dosis propuesta para uso en humanos (desde 1\/250 hasta 1\/4000).<\/p>\n<p>La proliferaci\u00f3n celular ser\u00e1 evaluada a trav\u00e9s de la t\u00e9cnica de incorporaci\u00f3n de Timidina tritiada (20 Ci\/mmol). Para ello, los cultivos celulares ser\u00e1n pulsados por un periodo de 16 hs en el caso de los linfocitos normales y de 6 hs para las c\u00e9lulas tumorales con Timidina tritiada, luego de lo cual los n\u00facleos celulares son retenidos por filtraci\u00f3n de papel de fibra de vidrio, Whatmann GF\/A. La Timidina radioactiva incorporada al ADN ser\u00e1 cuantificada en contador de centelleo l\u00edquido Wallac.<\/p>\n<p>La concentraci\u00f3n de c\u00e9lulas a utilizar ser\u00e1: para la l\u00ednea tumoral de 3&#215;105 c\u00e9lulas\/ml (concentraci\u00f3n celular \u00f3ptima final) y para las c\u00e9lulas normales 2&#215;106 c\u00e9lulas\/ml. Ambos tipos celulares ser\u00e1n cultivados en medio RPMI 1640 suplementado con 10% de suero fetal bovino y 2mM de glutamina y en presencia de los antibi\u00f3ticos penicilina (100 U\/ml) y estreptomicina (100 \u00b5g\/ml).<\/p>\n<h2>Curvas Dosis &#8211; Respuesta.<\/h2>\n<p class=\"cuerpo\"><strong>PRODUCTO FINAL (PF)<\/strong><\/p>\n<p class=\"cuerpo\">Una vez comprobada la efectividad de la formulaci\u00f3n de la tintura madre mediante experimentaci\u00f3n con animales, se realiz\u00f3 un barrido abarcando un amplio espectro con diferentes diluciones y veh\u00edculos.<\/p>\n<p>De este barrido se originaron los datos de la Tabla 1: \u00abCurva Dosis &#8211; Respuesta\u00bb<\/p>\n<table border=\"1\" width=\"466\" cellspacing=\"0\" align=\"center\">\n<tbody>\n<tr bgcolor=\"#FF9900\">\n<td rowspan=\"2\" width=\"52\">\n<div class=\"cuerpo Estilo17 Estilo3 Estilo19\">\n<div>Diluci\u00f3n<\/div>\n<\/div>\n<\/td>\n<td colspan=\"2\">\n<div class=\"cuerpo Estilo17 Estilo3 Estilo19\">\n<div>\n<p>PF1<\/p>\n<p>(90% Solvente 1. 10% TM)<\/p>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/td>\n<td colspan=\"2\">\n<div class=\"cuerpo Estilo17 Estilo3 Estilo19\">\n<div>\n<p>PF2<\/p>\n<p>(85% Solvente 1, 5% Solvente 2, 10% TM)<\/p>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/td>\n<td colspan=\"2\">\n<div class=\"cuerpo Estilo17 Estilo3 Estilo19\">\n<div>\n<p>PF3<\/p>\n<p>(80% Solvente 1, 10% Solvente 2, 10% TM)<\/p>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td bgcolor=\"#FF9900\" width=\"46\">\n<div class=\"cuerpo Estilo17 Estilo3 Estilo19\">\n<div>I.E.<\/div>\n<\/div>\n<\/td>\n<td bgcolor=\"#FF9900\" width=\"54\">\n<div class=\"cuerpo Estilo17 Estilo3 Estilo19\">\n<div>% Inhib<\/div>\n<\/div>\n<\/td>\n<td bgcolor=\"#FF9900\" width=\"70\">\n<div class=\"cuerpo Estilo17 Estilo3 Estilo19\">\n<div>I.E.<\/div>\n<\/div>\n<\/td>\n<td bgcolor=\"#FF9900\" width=\"74\">\n<div class=\"cuerpo Estilo17 Estilo3 Estilo19\">\n<div>% Inhib<\/div>\n<\/div>\n<\/td>\n<td bgcolor=\"#FF9900\" width=\"63\">\n<div class=\"cuerpo Estilo17 Estilo3 Estilo19\">\n<div>I.E.<\/div>\n<\/div>\n<\/td>\n<td bgcolor=\"#FF9900\" width=\"77\">\n<div class=\"cuerpo Estilo17 Estilo3 Estilo19\">\n<div>% Inhib<\/div>\n<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr class=\"Estilo20\">\n<td>\n<div class=\"cuerpo Estilo17 Estilo3 Estilo19\">\n<div class=\"Estilo21\">1\/10<\/div>\n<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"cuerpo Estilo17 Estilo3 Estilo19\">\n<div class=\"Estilo21\">0.22<\/div>\n<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">77.0<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0.24<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">76.25<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0.23<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">77<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr class=\"Estilo20\">\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">1\/25<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0.35<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">64.8<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0.44<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">55.8<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0.46<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">53.6<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr class=\"Estilo20\">\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">1\/50<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0.60<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">39.9<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0.67<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">33<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0.62<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">38.2<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr class=\"Estilo20\">\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">1\/100<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0.87<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">12.8<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0.78<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">21.9<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0.66<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">34.2<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr class=\"Estilo20\">\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">1\/200<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0.98<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">2.2<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0.96<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0.73<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">27<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr class=\"Estilo20\">\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">1\/400<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">1.03<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0.99<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">0.86<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo20\">13.8<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<\/tbody>\n<\/table>\n<p align=\"center\"><span class=\"Estilo8 Estilo3 Estilo17\"><strong>TABLA 1: \u00abCurva Dosis &#8211; Respuesta\u00bb<\/strong><\/span><\/p>\n<p><span class=\"Estilo8 Estilo3 Estilo17\">Tal como se evidencia en la Figura 1: \u00abGr\u00e1fica Curva Dosis &#8211; Respuesta\u00bb la dosis \u00f3ptima (mayor efecto terap\u00e9utico con nulos efectos secundarios) es 1\/400 y la formulaci\u00f3n \u00f3ptima es la PF3 la cual ha evidenciado un porcentaje de inhibici\u00f3n de proliferaci\u00f3n celular de 13.8 % a la mencionada diluci\u00f3n.<\/span><\/p>\n<p><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" class=\"aligncenter size-full wp-image-99\" title=\"dosis-respuesta\" src=\"http:\/\/www.basquade.com\/wpin\/wp-content\/uploads\/2009\/08\/dosis-respuesta.gif\" alt=\"dosis-respuesta\" width=\"600\" height=\"370\" srcset=\"https:\/\/www.basquade.com\/wpin\/wp-content\/uploads\/2009\/08\/dosis-respuesta.gif 600w, https:\/\/www.basquade.com\/wpin\/wp-content\/uploads\/2009\/08\/dosis-respuesta-150x92.gif 150w, https:\/\/www.basquade.com\/wpin\/wp-content\/uploads\/2009\/08\/dosis-respuesta-300x185.gif 300w\" sizes=\"auto, (max-width: 600px) 100vw, 600px\" \/>Figura 1: \u00abGr\u00e1fica Curva Dosis &#8211; Respuesta\u00bb<\/p>\n<p>Haciendo una extrapolaci\u00f3n de los resultados obtenidos la diluci\u00f3n 1\/400 equivale a una posolog\u00eda de 240 gotas por d\u00eda. Este resultado se obtiene teniendo en cuenta que el volumen de 1 gota es de 0,05 ml., por lo que 240 gotas equivalen a 12 ml. de Basq\u00fcad\u00e9 diluidos en la volemia (vol\u00famen de sangre de un adulto = 5.000 ml.).<\/p>\n<p>La ingesta de 12 ml. de Basq\u00fcad\u00e9 se diluye en 5.000 ml. de sangre lo que equivale a 1 ml. en 416 ml de sangre.<\/p>\n<p>Es importante destacar que en este estudio se comprob\u00f3 la importancia de agitar el producto previo a su administraci\u00f3n para una homogeneizaci\u00f3n del mismo, de acuerdo a sus propiedades organol\u00e9pticas.<\/p>\n<h2>Cin\u00e9tica Celular \u00abIn Vitro\u00bb<\/h2>\n<p class=\"cuerpo\">Una vez determinada la formulaci\u00f3n y posolog\u00eda \u00f3ptima de acuerdo a la acci\u00f3n inhibitoria del crecimiento en l\u00edneas celulares BW en 24 horas se pas\u00f3 a experimentar la Cin\u00e9tica en 48 horas.<\/p>\n<p class=\"cuerpo\">En la TABLA 1: \u00abInhibici\u00f3n del crecimiento en l\u00ednea celular BW en 24hs.\u00bb se presentan los resultados de las dos formulaciones (PF1 y PF3), como porcentaje de la inhibici\u00f3n del crecimiento de l\u00edneas celulares BW en 24 horas, que en la primera fase de experimentaci\u00f3n mostraron diferencias significativas referente a los porcentajes inhibici\u00f3n del crecimiento celular.<\/p>\n<table border=\"1\" width=\"460\" cellspacing=\"0\" align=\"center\">\n<tbody>\n<tr class=\"subtitulo\" bgcolor=\"#FF9900\">\n<td rowspan=\"2\" valign=\"top\" width=\"85\">\n<div class=\"Estilo19\">Diluci\u00f3n<\/div>\n<\/td>\n<td class=\"subtitulo\" colspan=\"2\">\n<div class=\"Estilo15\">PF1<\/div>\n<\/td>\n<td class=\"subtitulo\" colspan=\"2\">\n<div class=\"Estilo15\">PF3<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td bgcolor=\"#FF9900\" width=\"118\">\n<div class=\"Estilo22\">\u00cdndice de Estimulaci\u00f3n<\/div>\n<\/td>\n<td bgcolor=\"#FF9900\" width=\"101\">\n<div class=\"Estilo22\"><strong>Inhibici\u00f3n<br \/>\n(%) <\/strong><\/div>\n<\/td>\n<td bgcolor=\"#FF9900\" width=\"83\">\n<div class=\"Estilo22\"><strong>\u00cdndice de Estimulaci\u00f3n<\/strong><\/div>\n<\/td>\n<td bgcolor=\"#FF9900\" width=\"116\">\n<div class=\"Estilo22\">\n<p><strong>Inhibici\u00f3n<\/strong><\/p>\n<p><strong>(%) <\/strong><\/p>\n<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">1\/10<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.15<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">84.7<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.14<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">85.3<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">1\/25<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.28<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">71.4<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.26<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">73.6<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">1\/50<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.52<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">47.9<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.53<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">47.0<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">1\/100<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.76<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">23.7<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.58<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">41.8<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">1\/200<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.89<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">10.9<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.68<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">31.7<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">1\/400<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.95<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">4.3<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.77<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">22.9<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<\/tbody>\n<\/table>\n<div>\n<p><span class=\"Estilo15 Estilo3 Estilo8\">TABLA 1: Inhibici\u00f3n del crecimiento en l\u00ednea celular BW en 24hs.<\/span><\/p>\n<\/div>\n<p class=\"cuerpo\">Nuevamente tal como se ve en la Tabla 1: \u00abInhibici\u00f3n del crecimiento en l\u00ednea celular BW en 24hs.\u00bb, a mayores diluciones los sucesivos porcentajes de inhibici\u00f3n fueron decrecientes, resultando la mayor efectividad de la formulaci\u00f3n PF3.<\/p>\n<p class=\"cuerpo\">En la TABLA 2: \u00abInhibici\u00f3n del crecimiento en l\u00ednea celular BW en 48hs.\u00bb, se presentan los resultados expresados como porcentaje de inhibici\u00f3n de crecimiento en l\u00edneas celulares BW en 48 horas. Nuevamente se incluyeron las formulaciones PF1 y PF3 debido a que estas en la primera fase de experimentaci\u00f3n mostraron diferencias significativas referente a los porcentajes inhibici\u00f3n del crecimiento celular, pretendi\u00e9ndose descartar la posibilidad de un comportamiento diferente a las 48 horas.<\/p>\n<table border=\"1\" width=\"407\" cellspacing=\"0\" align=\"center\">\n<tbody>\n<tr bgcolor=\"#FF9900\">\n<td class=\"cuerpo\" rowspan=\"2\">\n<div><strong>Diluci\u00f3n<\/strong><\/div>\n<\/td>\n<td class=\"cuerpo\" colspan=\"2\">\n<div><strong>PF1<\/strong><\/div>\n<\/td>\n<td class=\"cuerpo\" colspan=\"2\">\n<div><strong>PF3<\/strong><\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td bgcolor=\"#FF9900\">\n<div class=\"Estilo24\">\u00cdndice de Estimulaci\u00f3n<\/div>\n<\/td>\n<td bgcolor=\"#FF9900\">\n<div class=\"Estilo24\">\n<p>Inhibici\u00f3n<\/p>\n<p>(%)<\/p>\n<\/div>\n<\/td>\n<td bgcolor=\"#FF9900\">\n<div class=\"Estilo24\">\u00cdndice de Estimulaci\u00f3n<\/div>\n<\/td>\n<td bgcolor=\"#FF9900\">\n<div class=\"Estilo24\">\n<p>Inhibici\u00f3n<\/p>\n<p>(%)<\/p>\n<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">1\/10<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.001<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">99.8<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.001<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">99.87<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">1\/25<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.007<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">99.2<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.002<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">99.7<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">1\/50<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.16<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">84.0<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.028<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">97.0<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">1\/100<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.68<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">31.57<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.24<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">75.0<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">1\/200<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.87<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">13.0<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.65<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">31.0<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">1\/400<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.92<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">7.8<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">0.72<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo22\">28.2<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<\/tbody>\n<\/table>\n<div>\n<p><span class=\"Estilo8 Estilo3 Estilo31\"><strong>TABLA 2: Inhibici\u00f3n del crecimiento en l\u00ednea celular BW en 48hs.<\/strong><\/span><\/p>\n<\/div>\n<p class=\"cuerpo\">Como primera conclusi\u00f3n en ambas formulaciones luego de las 48 hs el efecto de inhibici\u00f3n a la dosis terap\u00e9utica fue mayor que a las 24 hs, lo que demuestra un efecto de acumulaci\u00f3n (cin\u00e9tica de acumulaci\u00f3n) en beneficio del objetivo deseado que es el efecto antiproliferativo.<\/p>\n<p>Tambi\u00e9n en las 48 horas, la mayor inhibici\u00f3n en t\u00e9rminos absolutos del crecimiento en l\u00edneas celulares BW a la dosis terap\u00e9utica result\u00f3 de la formulaci\u00f3n PF3.<\/p>\n<p class=\"cuerpo\">Es as\u00ed que se frena la cin\u00e9tica celular impidiendo el crecimiento tumoral.<\/p>\n<h2>Efecto Citost\u00e1tico.<\/h2>\n<p class=\"cuerpo\">En el cuadro N\u00ba1 se comprueba el efecto acumulativode la acci\u00f3n antitumoral de Basquad\u00e9 mediante sucesivos incrementos ascendentes en el efecto Inhibitorio sobre la proliferaci\u00f3n de las c\u00e9lulas tumorales BW (medido como % Inhibici\u00f3n de la proliferaci\u00f3n celular).<\/p>\n<p class=\"cuerpo\">Estas inhibiciones se constataron comparando el % de inhibici\u00f3n resultante de la aplicaci\u00f3n de Basquad\u00e9 sobre los cultivos de c\u00e9lulas tumorales BW, contra los % de Proliferaci\u00f3n detectados en muestras de c\u00e9lulas en ausencia de cualquier extracto (basales), para los per\u00edodos de tiempo y las concentraciones descriptas en la tabla.<\/p>\n<p class=\"cuerpo\">A modo de interpretaci\u00f3n de los conceptos arriba explicados equivale a decir que para la diluci\u00f3n 1\/400 (dosis terap\u00e9utica) a las 96 horas se encontr\u00f3 una proliferaci\u00f3n de las c\u00e9lulas tumorales BW tratadas con Basquad\u00e9 un 29.6 % inferior que las mismas c\u00e9lulas tumorales que no fueron tratadas con el medicamento.<\/p>\n<table border=\"1\" width=\"283\" cellspacing=\"0\" align=\"center\">\n<tbody>\n<tr bgcolor=\"#FF9900\">\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">\n<p>TIEMPO<\/p>\n<p>(horas)<\/p>\n<\/div>\n<\/td>\n<td colspan=\"3\">\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">Proliferaci\u00f3n (% INHIBICION)<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr bgcolor=\"#FF9900\">\n<td><span class=\"Estilo19\">44<br \/>\n<\/span><\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">1:50<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">1:200<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">1:400<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">24<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">55.0<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">37.0<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">24.9<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">48<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">74.0<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">35.5<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">22.3<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">72<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">92.0<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">26.4<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">25.0<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">96<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">92.5<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">30.7<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo3 Estilo17 Estilo18\">29.6<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<\/tbody>\n<\/table>\n<p class=\"Estilo8 Estilo3 Estilo18\"><strong>Cuadro N\u00ba1 : Efecto Inhibitorio de Basquad\u00e9\u00a0sobre l\u00edneas de c\u00e9lulas tumorales BW .<\/strong><\/p>\n<p class=\"cuerpo\">En este ensayo queda nuevamente demostrada la tendencia a la acentuaci\u00f3n del efecto antiproliferativo provocado por Basquad\u00e9 en los cultivos de l\u00edneas celulares tumorales BW. Esta tendencia acumulativa del efecto antitumoral infiere la importancia de mantener cierta continuidad en la aplicaci\u00f3n del tratamiento para capitalizar esta propiedad.<\/p>\n<p class=\"cuerpo\">En posteriores ensayos mediante la tinci\u00f3n con la tintura excluyente \u201cAzul Trip\u00e1n\u201d se intentar\u00e1 demostrar un eventual efecto CITOT\u00d3XICO resultante de la aplicaci\u00f3n de Basquad\u00e9 en los cultivos de c\u00e9lulas tumorales BW, mediante ensayos de VIABILIDAD CELULAR.<\/p>\n<h2>Efecto Citot\u00f3xico.<\/h2>\n<p class=\"cuerpo\">Mediante el estudio de viabilidad de las c\u00e9lulas tumorales BW con la t\u00e9cnica de la<\/p>\n<p class=\"cuerpo\">tinci\u00f3n con \u201cAzul Trip\u00e1n\u201d se ha comprobado un importante efecto CITOT\u00d3XICO resultante de la aplicaci\u00f3n de Basquad\u00e9 en los cultivos de c\u00e9lulas tumorales BW tal como surge de la interpretaci\u00f3n de los datos en el Cuadro 1.<\/p>\n<p class=\"cuerpo\">Los % de Viabilidad a cada tiempo se calculan teniendo en cuenta la cantidad de c\u00e9lulas vivas (que no incluyen el colorante de exclusi\u00f3n Azul Trip\u00e1n) con respecto al total de c\u00e9lulas (Vivas + muertas). Las c\u00e9lulas muertes son las que incorporan el colorante y por lo tanto se ven de color azul a la observaci\u00f3n microsc\u00f3pica.<\/p>\n<table border=\"1\" width=\"270\" cellspacing=\"0\" align=\"center\">\n<tbody>\n<tr bgcolor=\"#FF9900\">\n<td rowspan=\"2\">\n<div class=\"Estilo18\">\n<p>TIEMPO<\/p>\n<p>(horas)<\/p>\n<\/div>\n<\/td>\n<td colspan=\"3\">\n<div class=\"Estilo18\">% VIABILIDAD<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td bgcolor=\"#FF9900\">\n<div class=\"Estilo18\">1:50<\/div>\n<\/td>\n<td bgcolor=\"#FF9900\">\n<div class=\"Estilo18\">1:200<\/div>\n<\/td>\n<td bgcolor=\"#FF9900\">\n<div class=\"Estilo18\">1:400<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo18\">24<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo18\">79<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo18\">70<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo18\">89<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo18\">48<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo18\">58<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo18\">69<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo18\">78<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo18\">72<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo18\">27<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo18\">58<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo18\">78<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<tr>\n<td>\n<div class=\"Estilo18\">96<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo18\">21<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo18\">33<\/div>\n<\/td>\n<td>\n<div class=\"Estilo18\">49<\/div>\n<\/td>\n<\/tr>\n<\/tbody>\n<\/table>\n<p class=\"Estilo8 Estilo3 Estilo30\" align=\"center\"><strong> Cuadro 1: % de Viabilidad Celular Determinado\u00a0por la t\u00e9cnica de tinci\u00f3n con Azul Trip\u00e1n.<\/strong><\/p>\n<p>Una vez determinado el efecto CITOST\u00c1TICO mediante la aplicaci\u00f3n de Basquad\u00e9 (constatado por la consistente inhibici\u00f3n de la proliferaci\u00f3n celular en cultivos de c\u00e9lulas tumorales BW), se procedi\u00f3 a determinar mediante el % de Viabilidad<\/p>\n<p>ad celular el efecto CITOTOXICO resultante de la aplicaci\u00f3n de Basquad\u00e9 en los cultivos de l\u00edneas de c\u00e9lulas tumorales BW.<\/p>\n<p class=\"cuerpo\">Mediante el mencionado ensayo se constat\u00f3 consistentemente a per\u00edodos de tiempo crecientes una disminuci\u00f3n de la viabilidad celular o lo que es lo mismo una disminuci\u00f3n de c\u00e9lulas tumorales vivas.<\/p>\n<p class=\"cuerpo\">Por lo tanto se puede concluir que Basquad\u00e9 no solo inhibe el crecimiento celular tumoral sino que tambi\u00e9n act\u00faa matando las c\u00e9lulas tumorales, propiedades que lo convierten en un muy interesante medicamento antitumoral.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<a href=\"https:\/\/www.basquade.com\/wpin\/wp-content\/uploads\/2017\/10\/invitro-conicet.pdf\" class=\"pdfemb-viewer\" style=\"\" data-width=\"max\" data-height=\"max\" data-mobile-width=\"500\"  data-scrollbar=\"none\" data-download=\"on\" data-tracking=\"on\" data-newwindow=\"on\" data-pagetextbox=\"off\" data-scrolltotop=\"off\" data-startzoom=\"100\" data-startfpzoom=\"100\" data-toolbar=\"bottom\" data-toolbar-fixed=\"on\">invitro-conicet<br\/><\/a>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Protocolo de Investigaci\u00f3n Cient\u00edfica. PROTOCOLO DE TRABAJO Ensayos cin\u00e9ticos de proliferaci\u00f3n celular Estos ensayos se realizar\u00e1n sobre dos tipos celulares: C\u00e9lulas tumorales: l\u00ednea tumoral linfoide de origen murino BW 5147 que expresa el haplotipo H-2k, CD3+ y el TCRa\u00df, los cuales son testeados rutinariamente por citometr\u00eda de flujo usando anticuerpos espec\u00edficos contra los correspondientes marcadores&#8230;<\/p>\n","protected":false},"author":2,"featured_media":0,"parent":0,"menu_order":0,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"","meta":{"_monsterinsights_skip_tracking":false,"_monsterinsights_sitenote_active":false,"_monsterinsights_sitenote_note":"","_monsterinsights_sitenote_category":0,"footnotes":""},"class_list":["post-598","page","type-page","status-publish","hentry"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.basquade.com\/wpin\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/598","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.basquade.com\/wpin\/wp-json\/wp\/v2\/pages"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.basquade.com\/wpin\/wp-json\/wp\/v2\/types\/page"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.basquade.com\/wpin\/wp-json\/wp\/v2\/users\/2"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.basquade.com\/wpin\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=598"}],"version-history":[{"count":2,"href":"https:\/\/www.basquade.com\/wpin\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/598\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":609,"href":"https:\/\/www.basquade.com\/wpin\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/598\/revisions\/609"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.basquade.com\/wpin\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=598"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}